產(chǎn)品概述

表皮生長(zhǎng)因子是一個(gè)由53個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的分子量為6kDa無糖原基化的蛋白質(zhì)。它源于150~170kDa的I 型跨膜前體蛋白。小鼠前體蛋白的前身由1217個(gè)氨基酸組成，其中有28個(gè)信號(hào)蛋白，1010個(gè)位于細(xì)胞外圍，20個(gè)跨膜區(qū)，159個(gè)位于細(xì)胞質(zhì)。具有活性的成熟EGF僅由蛋白酶從很多最接近EGF的隔膜水解而來。小鼠EGF與人、大鼠和豬的EGF在氨基酸序列水平上分別由70%，73%和74%的同源性。

產(chǎn)品原理

本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法?？剐∈驟GF單抗包被于酶標(biāo)板上，同時(shí)加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品和生物素化的抗小鼠EGF抗體，標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品中的EGF會(huì)與加入于孔中的生物素化的抗小鼠EGF抗體及包被于酶標(biāo)板上的單抗結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素，親合素與生物素特異性結(jié)合，游離的成分被洗去。加入顯色底物（顯色劑），若反應(yīng)孔中有EGF，辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑變藍(lán)，加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值，EGF濃度與OD₄₅₀值之間呈正相關(guān)，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中EGF濃度。

產(chǎn)品性能

1. 靈敏度：最小可測(cè)小鼠EGF達(dá)15pg/ml。

2.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<10%。

產(chǎn)品組分及儲(chǔ)存條件

試驗(yàn)所需自備儀器和試劑:

1. 酶標(biāo)儀(450nm檢測(cè)波長(zhǎng)濾光片，570nm或630nm校正波長(zhǎng)濾光片)。

2. 高精度加液器及一次性吸頭：0.5-10μl，2-20μl，20-200μl，200-1000μl。

3. 37℃恒溫箱、蒸餾水或去離子水、坐標(biāo)紙。

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